膜片鉗灌流系統(tǒng)的構成
1、輸入動力: 基本分兩種,重力灌流和蠕動泵灌流。
2、管子: 這沒什么好說的吧,盡可能少用轉接,保證良好的密封性。
3、輸出動力: 也分兩種,用真空泵吸出,或者用蠕動泵吸出。
二、對膜片鉗灌流系統(tǒng)的幾點要求
1 傳輸要穩(wěn)定
這是很重要的一個要求,傳輸忽快忽慢、甚至回吸(這個蠕動泵可能出現的問題),都會導致chamber里面液面的震動,都會導致你無法穩(wěn)定地鉗制細胞。
重力灌流時,隨著管中液面的下降,壓強是下降的(液壓公式P=ρgh),會影響速度,我們一般會加一個輸液管的調速器、或者Warner公司的flow valve(FR50或55)來穩(wěn)定速度,這個我只試過,沒正兒八經地用過,一切以實踐為準。每隔一會兒就得注意補充溶液,挺麻煩的。
蠕動泵么,速度倒是可以很穩(wěn)定,但問題在于不是絕對連續(xù),你觀察一下它的傳輸結構就可以知道,溶液是靠棘輪一下一下擠出去的,只是速度快了、管子細了,你就看不出來了。
(2)膜片鉗灌流系統(tǒng)出液口的氣泡問題
出液的速度是液面高度的決定因素。出液速度必須等于或略大于入液速度,所以,出液口肯定是會吸入氣泡的,所吸入氣泡的大小決定著液面的震動幅度。調節(jié)出液速度、出液口的位置時,比較依賴經驗,新手一定要耐心。
2 噪音要小
這里說的噪音,包括聲音和電磁噪聲。重力灌流的最大優(yōu)點就是這兩種噪音都沒有。我們以前用進口的WPI的蠕動泵,聲音那叫一個大,它的外號叫“老板機”,意思是老板在隔壁可以通過聽聲音來判斷你是否在干活(絕對是周扒皮的路數)。
3 傳輸距離要短
溶液距離chamber盡可能近一些,主要有兩個優(yōu)點:
1.新鮮的溶液可以盡快到達組織;
2.膜片鉗灌流系統(tǒng)加藥的時候等待的時間短,節(jié)省時間的同時,也可以避免夜長夢多;